证券时报多媒体数字报

  本公司及董事会全体成员保证信息披露的内容真实、准确和完整，没有虚假记载、误导性陈述或重大遗漏。

  风险提示:

  鉴于糖宁通络胶囊研发项目的复杂性、风险性和不确定性，糖宁通络胶囊项目研制具有周期长、投入较大的情况，各阶段研究均具有风险性，公司将及时履行信息披露义务，请投资者注意投资风险。

  公司本次公告的研究报告为糖宁通络胶囊对糖尿病部分并发症影响的动物试验报告，实验的目的是采用目前国际通用的db/db自发性糖尿病小鼠模型，在检测到出现糖尿病视网膜病变（微血管瘤）后进行药物干预，考察糖宁通络胶囊对糖尿病视网膜病变的干预作用及可能的作用机理，为糖宁通络胶囊的临床应用提供科学依据。本报告的结论存在与临床应用情况出现差异的可能性风险。

  本公告为研发项目进展公告，不会对公司目前经营产生重大影响。

  贵州百灵企业集团制药股份有限公司（以下简称：“公司”或“贵 州百灵”）2014 年11月13 日收到中国医学科学院药用植物研究所编制的《糖宁通络胶囊对db/db自发性糖尿病小鼠糖尿病视网膜病变的影响报告》，现对该项目研发进展情况作如下信息披露。

  试验基本情况：

  1、实验药物名称：糖宁通络胶囊

  2、实验单位：中国医学科学院药用植物研究所

  3、实验内容：糖宁通络胶囊对db/db自发性糖尿病小鼠糖尿病视网膜病变的影响

  4、研究目的：采用目前国际通用的db/db自发性糖尿病小鼠模型，在检测到出现糖尿病视网膜病变（微血管瘤）后进行药物干预，考察糖宁通络胶囊对糖尿病视网膜病变的干预作用及可能的作用机理，为糖宁通络胶囊的临床应用提供科学依据。

  试验报告内容详见附件：《糖宁通络胶囊对db/db自发性糖尿病小鼠糖尿病视网膜病变的影响报告》。

  敬请广大投资者谨慎决策，注意投资风险。

  特此公告。

  贵州百灵企业集团制药股份有限公司

  董 事 会

  2014年11月13日

  附件：

  实 验 报 告

  研究专题的名称：糖宁通络胶囊对db/db自发性糖尿病小鼠糖尿病视网膜病变的影响

  实验报告的审查、批准

  专 题 负责人 孙晓波 签名 2014 年 11月 6 日 撰写

  实验室负责人 孙晓波 签名 2013 年 11月 12日 批准

  试验单位：中国医学科学院药用植物研究所

  试验地点：北京市海淀区马连洼北路151号

  试验时间：2013.11.31-2014.11. 5

  摘 要

  目的：采用目前国际通用的db/db自发性糖尿病小鼠模型，在检测到出现糖尿病视网膜病变（微血管瘤）后进行药物干预，考察糖宁通络胶囊对糖尿病视网膜病变的干预作用及可能的作用机理，为糖宁通络胶囊的临床应用提供科学依据。

  方法：以C57为正常对照，采用26～28 周龄db/db自发性糖尿病小鼠作为模型，在眼底荧光造影检测确定出现糖尿病视网膜病变（微血管瘤）后给药处理14周，每周测定血糖，记录动物一般状况，摄食量和饮水量，在给药处理14周后进行眼底视网膜荧光检查，在末次给药后，麻醉动物取血清测定糖化血红蛋白等指标，同时对主要脏器进行病理检查。

  结果：糖宁通络胶囊（高、中、低三个剂量组）和二甲双胍组具有显著的降血糖作用，金芪降糖颗粒具有一定的降糖作用。db/db小鼠在26～28周龄时，眼底荧光造影检测确证db/db各组动物视网膜出现显著的微血管瘤病变（糖尿病视网膜早期特征性病变）。给药干预14周后荧光造影结果显示：模型组小鼠眼底微血管瘤遍布视网膜，模型组和阳性对照药组（二甲双胍和金芪降糖）微血管瘤密度均显著增加；糖宁通络干预后与治疗前相比微血管瘤密度显著减少。糖宁通络（高、中剂量）组14周给药干预后与干预前微血管瘤密度减少最为显著，糖宁通络一定程度逆转和显著改善了眼底病变程度。

  结论：糖宁通络胶囊具有显著的降糖效果，并可一定程度逆转和显著改善糖尿病引起的微血管病变。1 研究专题的名称及研究目的

  1.1 研究专题名称：

  糖宁通络胶囊对db/db自发性糖尿病小鼠降糖作用及糖尿病并发症的影响

  1.2 研究背景：

  糖尿病是以慢性、高血糖为特征的一种糖、脂类和蛋白质代谢异常性疾病，其中2 型糖尿病占该病的95%，已成为严重威胁人类健康的一大杀手。WHO最新（2013年10月）统计数据显示：全世界有3.47亿人患有糖尿病；还预测2030年全球糖尿病患者将达到5亿，糖尿病将成为第七位主要死因。最新的统计数据表明：中国已成为全球第一大糖尿病国，患者总数超过1.2亿，50.1%的成人（超过6亿）处于糖尿病前期；糖尿病的慢性血管并发症对患者的生命和生活质量威胁极大，给家庭以及患者个人带来沉重的经济负担。柳叶刀杂志在2014年9月刊文指出“在一个经济越来越强大的国家，糖尿病现在可以被视为实现进一步增长和稳定的道路上的一个可量化的障碍。”（Chan JC, Zhang Y, Ning G. Diabetes in China: a societal solution for a personal challenge. Lancet Diabetes Endocrinol. 2014 Sep 10. pii: S2213-8587(14)70144-5.）。2014年9月15日，彭博社发表《糖尿病会让中国脱轨吗？》的报道。糖尿病已经是流行病，中国控制这一危机的难度将高于美国和其他发达国家。政府还必须赶在这一艰巨挑战真的变得无法控制之前立刻采取行动。

  1.3 研究目的：

  采用国际公认的db/db自发性糖尿病小鼠模型，在检测到出现糖尿病视网膜病变（微血管瘤）后进行药物干预，考察糖宁通络胶囊对糖尿病视网膜病变的干预作用及可能的作用机理，为糖宁通络胶囊的临床应用提供科学依据。

  2 药效学评价研究机构和委托单位的名称及地址

  2.1药效学评价研究机构

  名称：中国医学科学院药用植物研究所

  地址：北京市海淀区马连洼北路151号

  邮编：100193

  电话：010-57833013

  2.2 委托单位：贵州百灵企业集团制药股份有限公司

  地址： 贵州省安顺市经济技术开发区西航大道

  电话：(0853)3418777

  3 研究起止日期

  实验起始日期：2013年11月31日

  实验结束日期：2014年11月5日

  4 供试品及对照品的名称、缩写名、代号、批号、稳定性、含量、浓度、纯度、组分及其它特性

  4.1 供试品

  名称： 糖宁通络胶囊

  批号：20130401

  提供者：贵州百灵企业集团制药股份有限公司

  接收时间：2013年6月1日

  性状： 胶囊，内容为黑褐色粉末

  溶解性：可溶于水

  稳定性：稳定

  保存条件：密封

  保存场所：中国医学科学院药用植物研究所样品室

  剩余供试品处理方法：留样

  4.2 对照品（溶剂）

  名称：蒸馏水

  4.3 供试品配制

  4.3.1 配制方法：用蒸馏水配制成所需浓度。

  4.3.2 配制频率：试验现用现配。

  5试验材料

  5.1试验动物： SPF级自发性糖尿病小鼠模型C57/KsJ-db/db小鼠(简称db/db小鼠)，6～8周龄，体重 45～55g，雌性；由中国科学院上海实验动物中心/上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。

  5.2试验药物：糖宁通络胶囊（批号：20130401，规格：0.3g/粒，相当于1.1g生药/粒，人用量每次3粒，每日三次）由贵州百灵企业集团制药股份有限公司提供。

  盐酸二甲双胍片由中美上海施贵宝制药有限公司生产（批号：1303107）。适应症：高胰岛素血症，2型糖尿病。用法用量：通常本品（盐酸二甲双胍片）的起始剂量为0.5克，每日二次。一日用药量为1g。

  金芪降糖颗粒（5g*10袋，批准文号：国药准字Z19991096）。生产企业：河南省宛西制药股份有限公司。功能主治：清热泻火，补益中气。用于内热兼气虚所致的消渴病，症见口渴喜饮，易饥多食，气短乏力；Ⅱ型轻、中度糖尿病见上述证候者。

  5.3仪器：稳豪型血糖试纸（批号：3462320）和稳豪型血糖仪购自强生（上海）医疗器材有限公司。酶标仪购自帝肯（上海）公司。日立7080 全自动生化仪购自日本日立株式会社。电子天平购自梅特勒托利多仪器（上海）有限公司。 Micron IV视网膜显微成像系统（Phoenix Micron IV In Vivo Retinal Imaging Microscope，Phoenix Research Labs, Pleasanton, CA, USA)。

  6 试验方法

  6.1动物一般状态观察

  60只雌性db/db小鼠（6～8周龄），在本实验室常规喂养20周，当平均空腹血糖值超过24.0mmol/L，在眼底荧光造影检测确定出现糖尿病视网膜病变（微血管瘤）后准备进行试验。同周龄C57雌性小鼠为空白对照组，60只雌性db/db小鼠随机分为6组，每组10只，试验分别为模型组、盐酸二甲双胍组、金芪降糖组、糖宁通络胶囊高剂量组、糖宁通络胶囊中剂量组、糖宁通络胶囊低剂量组，共 6 组，各组灌胃给药，每日 1 次，灌胃体积 0.1ml/10g，连续给药处理14周，其中空白对照组和模型组每天灌胃 0.1ml/10g 的饮用水。

  每周监测血糖1次，连续给药14周，同时对所有小鼠进行一般状况和行为检查。各组小鼠均分笼饲养，每日记录小鼠一般行为状态、饮水量和饲料消耗量，计算每只动物每日饮水量，每周测定 1 次小鼠体重。

  6.2对db/db小鼠空腹血糖的影响

  动物处理同4.1，每周监测一次空腹血糖，动物禁食不禁水5h后，用全自动血糖仪测定小鼠尾静脉血血糖值，给药期间，每周测定一次。

  6.3 对db/db小鼠眼底视网膜病变的影响

  给药和处理同上4.1。动物禁食不禁水，5h后测定空腹血糖和糖耐量之后，动物麻醉，复方托吡卡胺散瞳，腹腔注射荧光素钠注射液，Micron IV小动物眼底成像系统检测眼底视网膜病变。

  7试验结果

  7.1对db/db小鼠一般状态的影响

  db/db小鼠体型肥胖，分组时，体重明显高于C57对照组，活动减少，其他状态（如毛色）无变化。并且，随着时间的延长，体重不断增加，给药前，与db/db模型比较，二甲双胍和糖宁通络胶囊处理的db/db小鼠体型、活动、毛色组间无显著性改变。动物体重摄食量组间无显著差异，详见表-1。

  7.2 对db/db小鼠空腹血糖的影响

  分组时db/db小鼠各组血糖值具有可比性（不存在差异），与正常组比较db/db小鼠血糖值显著升高，给予药物处理14周后，与模型组比较各给药组空腹血糖显著降低，有统计学差异。持续给予药物处理12周，整个过程阳性药二甲双胍和糖宁通络组空腹血糖均显著降低，有统计学差异，结果见表-2.

  表-1 二甲双胍和糖宁通络胶囊对小鼠体重的影响（g ，■±SD，n=12）

  ■

  续上表

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  续上表

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  *，p＜0.05，与同时间点的正常对照组比较；#，p＜0.05，与同时间点的模型组比较。

  表-2 二甲双胍和糖宁通络胶囊对小鼠血糖的影响（mmol/L ，■±SD，n=12）

  ■

  续上表

  ■

  续上表

  ■

  *，p＜0.05，与正常对照组比较；△，p＜0.05，与模型组比较，#，p＜0.01，与模型组比较。

  7.3 对小鼠糖尿病视网膜病变的影响

  db/db小鼠在26～28周龄时，平均空腹血糖值超过24.0mmol/L，眼底荧光造影检测显示：db/db各组动物视网膜遍布微血管瘤，出现糖尿病视网膜早期病变的特征，正常对照动物眼底无微血管瘤。

  给药干预14周后荧光造影结果显示：与26～28周龄时相比，40～42周龄模型组小鼠眼底微血管瘤遍布视网膜，模型组和阳性对照药组（二甲双胍和金芪降糖）微血管瘤密度均显著增加；糖宁通络干预后（40～42周龄）与治疗前相比微血管瘤密度显著减少。糖宁通络（高、中剂量）组14周给药干预后与干预前微血管瘤密度减少最为显著，糖宁通络一定程度上逆转和显著改善了眼底病变程度，结果详见图-1

  ■

  图-1 药物干预对糖尿病小鼠视网膜病变荧光造影检查结果

  1组：正常对照组，2组：模型组，3组：二甲双胍组，4组：金芪降糖组，5组：糖宁通络组（1.8g/kg），6组：糖宁通络组（0.9g/kg），7组：糖宁通络组（0.45g/kg）。

  8小结

  8.1糖宁通络胶囊具有显著的降血糖作用

  上述试验结果表明糖宁通络胶囊（三个剂量组）具有显著的降低空腹血糖作用，二甲双胍和糖宁通络组间无显著性差异；金芪降糖颗粒具有一定的降低空腹血糖作用，但与二甲双胍和糖宁通络组相比具有显著性差异。

  8.2糖宁通络胶囊具有显著的改善和一定程度逆转微血管病变（糖尿病眼底病变）的作用

  糖宁通络胶囊对于糖尿病合并的微血管病变（糖尿病眼底病变）有一定的改善和逆转作用。给药干预14周后通过眼底荧光造影图像显示：金芪降糖、二甲双胍组和模型组眼底微血管瘤遍布视网膜；糖宁通络组可明显减少微血管瘤数量，糖宁通高、中剂量组作用更加显著。

  眼底荧光造影定量统计结果显示：14周治疗后糖宁通络（三个剂量组）与较模型组有显著差异（p ＜0.01），糖宁通络胶囊高、中剂量组微血管瘤数量（和密度）减少最为显著，显著改善了眼底病变程度。与二甲双胍组比较，糖宁通络胶囊高、中剂量组微血管瘤数量（和密度）亦显著减少（p ＜0.01）。

  给药干预14周前后自身对比结果显示：模型组、金芪降糖和二甲双胍组小鼠眼底微血管瘤遍布视网膜，且微血管瘤的密度较治疗前显著增加，未能有效抑制眼底微血管瘤的病程进展。14周糖宁通络治疗后与干预前比较，糖宁通络胶囊高、中剂量组微血管瘤密度显著减少，改善了眼底病变程度，一定程度逆转了眼底微血管瘤的病程进展。

  综上所述，糖宁通络胶囊具有显著的降糖效果，显著改善眼底病变程度，逆转和改善了眼底微血管瘤的病程的进展，与二甲双胍和金芪降糖相比具有优势。

  9讨论：

  2型糖尿病由遗传因素和环境因素共同作用，以慢性血糖升高，伴有脂代谢、蛋白代谢紊乱的代谢性疾病。改革开放以来，随着中国经济的高速增长，我国糖尿发病率已经从80年代不到1%发展到今天的近13%。2014年柳叶刀杂志刊文指出：中国已经成为全球第一大糖尿病国，患者总数超过1.2亿，50.1%的成人（超过6亿）处于糖尿病前期。糖尿病患者仅有30.1%被确诊，确诊的仅25.8%接受治疗，接受治疗的患者糖尿病控制率仅有39.7%。

  糖尿病并发微血管病变(DMAP)是糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)、糖尿病肾病(diabetic nephropathy， DN)、糖尿病性神经病变(diabetic neuropathy，DNP)等微血管病变共同的病理基础。无论是发达国家还是发展中国家，糖尿病视网膜病变是导致失明的第一原因。WHO指出糖尿病是导致社会致残人口出现的一个重要原因，因而成为全球公共卫生不堪重负的难点问题。

  db/db小鼠模型具有高血糖、高血脂和肥胖等异常特点，并随着饲养时间延长，相继出现心脏、肝脏和肾脏等病变，是进行2 糖尿病研究的良好动物模型。通过眼底荧光造影图像显示：二甲双胍组和模型组眼底微血管瘤遍布视网膜，糖宁通络组微血管瘤数量较模型组减少，其中中剂量减少最为显著；

  微血管瘤是糖尿病视网膜病变（非增殖期）的最早表现，是视网膜毛细血管囊样扩展引起。糖宁通络对微血管瘤形成具有显著作用，对已经出现微血管瘤的动物，糖宁通络胶囊干预后能降低视网膜微血管瘤的密度。糖尿病视网膜病变根本原因是机体糖代谢紊乱与微循环障碍，视网膜局部血管刺激因素与抑制因素之间的平衡破坏是引发血－视网膜屏障破坏、新生血管形成的直接原因，提示糖宁通络抑制和逆转微血管瘤形成的作用可能与其改善糖代谢紊乱和微循环障碍有关。

  糖宁通络胶囊具有较好的降糖作用，可纠正糖代谢异常、改善局部微循环；显著改善眼底病变程度，一定程度逆转了眼底微血管瘤病程的进展，与二甲双胍和金芪降糖相比具有优势，对降低病人的致盲、致残废和致死率以及提高其生存质量具有重要的科学意义和临床应用价值。

  10影响研究可靠性和造成研究工作偏离实验方案的异常情况

  在试验过程中未出现造成研究偏离试验方案的异常情况。

  11专题负责人与所有参加工作的人员姓名和承担的工作内容

  11.1 专题负责人：孙晓波

  11.2 给药及临床症状观察负责人：孙桂波

  参加人员：孙桂波、孟祥宝、王婷、卢珊

  11.3 动物饲养管理及检疫负责人：孙桂波

  参加人员：孙桂波、成龙、孟祥宝、王婷、卢珊

  11.4 供试品保管负责人：孙桂波

  11.5 资料保管负责人：孙晓波

  12实验资料的保存项目、地点及时间

  12.1保存项目：专题负责人任命书、实验方案、使用动物有关资料、有关供试品的资料、原始记录及原始数据（体重、给药、一般状态观察等）、解剖相关资料、质量保证相关的资料、总结报告书及其它资料。

  12.2 保存地点：中国医学科学院药用植物研究所。

  注：本试验仅对提供的供试品负责。

  [参考文献]

  1. Danaei G, Finucane MM, Lu Y, Singh GM, Cowan MJ, Paciorek CJ et al. National, regional, and global trends in fasting plasma glucose and diabetes prevalence since 1980: systematic analysis of health examination surveys and epidemiological studies with 370 country-years and 2.7 million participants. Lancet, 2011, 378(9785):31–40.

  2. Global health risks. Mortality and burden of disease attributable to selected major risks. Geneva, World Health Organization, 2009.

  3. Mathers CD, Loncar D. Projections of global mortality and burden of disease from 2002 to 2030. PLoS Med, 2006, 3(11):e442.

  4. Global status report on noncommunicable diseases 2010. Geneva, World Health Organization, 2011.

  5. Cheng L, Meng XB, Lu S，Wang TT，Liu Y Sun GB，Sun XB, Evaluation of hypoglycemic efficacy of Tangningtongluo formula, a traditional Chinese Miao medicine, in two rodent animal models. J Diabetes Res:745419；2014

  6. 《中国 2 型糖尿病防治指南》2010 年版. 中华医学会糖尿病学分会

  7. Yang WY, Lu JM, Weng JP, et al .Prevalence of Diabetes among Men and Women in China. N Engl J Med. 2010 ,25;362(12):1090-1101

  8. World Health Organization. Definition, diagnosis and classifications of diabetes mellitus and its complications. Report of a WHO consultation, Part 1: Diagnosis and classification of diabetes mellitus. Geneva: WHO, 1999.

  9. 周强，仝小林教授治疗糖尿病肾病用药规律分析及经验总结[D]中国中医科学院 2011.6

  10.张信岳 治疗2型糖尿病中药新药药效学研究中常见问题分析 http://www.cde.org.cn/dzkw.do method=largePage&id=1222

  11.朱飞鹏 治疗糖尿病药物临床前药效学试验进展和相关问题讨论http://www.cde.org.cn/dzkw.do method=largePage&id=1220